Margaret Cho begann ihre Schauspielkarriere mit einer Rolle in der Sitcom „All-American Girl" (1994–1995), bevor sie im Actionthriller „Face/Off" (1997) mit John Travolta und Nicolas Cage zu sehen war. Cho ist auch als Komikerin bekannt und veröffentlichte mehrere Stand-Up-Specials, darunter „Assassin" (2005), „Cho Dependent" (2011) und „PsyCHO" (2015). In der Comedy-Serie „30 Rock" (2011–2012) verkörperte sie den nordkoreanischen Diktator Kim Jong Il und wurde für ihren Auftritt für den Primetime Emmy Award nominiert. Als Synchronsprecherin war sie in Animationsserien wie „Tuca & Bertie" (2021–2022), „The Great North" (2021) und „Noonans" (2024) zu hören. Zu ihren Filmprojekten zählen die romantische Komödie „Fire Island" (2022), Steve Buscemis „The Listener" (2022) und das Drama „All That We Love" (2024), in dem sie die Hauptrolle spielt.